血清的存在會(huì)影響脂質(zhì)體的形成，建議配制核酸轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物時(shí)采用無血清培養(yǎng)基（一般推薦MEM 培養(yǎng)基）。

不能。本試劑一定要4 ℃保存，要注意避免反復(fù)多次長(zhǎng)時(shí)間開蓋，長(zhǎng)時(shí)間開蓋會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。

1）細(xì)胞鋪板密度較高，以90%-95%為佳；

2）使用高純度的DNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率；

3）制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí)要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑；

4）轉(zhuǎn)染的時(shí)候培養(yǎng)基中不能添加抗生素；

5）試劑應(yīng)該在4度保存，要注意避免多次反復(fù)長(zhǎng)時(shí)間開蓋；

6）初次使用應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和陽離子脂質(zhì)體試劑量以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2-1:3。

不需要。脂質(zhì)體復(fù)合物可以穩(wěn)定存在6個(gè)小時(shí)。如果在進(jìn)行轉(zhuǎn)染前沒有進(jìn)行細(xì)胞換液，為了保證細(xì)胞正常生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)，需要在4～6小時(shí)后換用新的培養(yǎng)基。但如果轉(zhuǎn)染之前已進(jìn)行過換液則在脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后不需要進(jìn)行再次換液。

1）轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的密度，90%-95%。

2）轉(zhuǎn)染時(shí)，核酸和脂質(zhì)體稀釋液要用MEM無血清培養(yǎng)基。

3）轉(zhuǎn)染后4-6h可選擇換液。

DNA和siRNA的共轉(zhuǎn)染時(shí)候，siRNA轉(zhuǎn)染效率差。